导语
内容提要
生命科学的迅速发展,使分子生物学越来越成为生命科学各领域的重要研究工具。本书是在多年来为本科生开设分子生物学综合实验的基础上编写而成。内容包括基因克隆、基因表达、核酸及蛋白质杂交等分子生物学常规实验。每个实验包括原理、试剂的配制、详细的实验操作、常见问题的说明及思考题,并详细讲述了如何建立各实验反应体系的原理方法,如PCR、酶切和连接体系等。本书所列的实验方法均是编者正在使用的、在实践教学中经过检验、切实可行的方法,是多年科研工作及教学实践的总结积累。书中所说明的问题是在实验准备及反应体系中要掌握的知识点。本书可作为高等院校生物、医药、农林等专业研究生和本科生实验的指导用书,也可供生物化学和分子生物学有关研究人员、企业技术人员等参考。
作者简介
胡汉桥,男,1968年1月生,湖北红安人,广东海洋大学滨海农业学院生物技术系教授、博士、硕士生导师。长期从事植物病害鉴定及抗病基因相关研究,主持和参与多项国家级及省级课题,发表论文30多篇,其中SCI论文10篇。主讲分子生物学、生物信息学和分子生物学实验等课程17年,具有丰富的教学经验和实践经验。
目录
前言
分子生物学实验注意事项
实验一 大肠杆菌质粒DNA提取
实验二 质粒DNA的酶切
实验三 核酸定量分析
实验四 琼脂糖凝胶电泳
实验五 总DNA提取
实验六 目的基因的PCR扩增及产物的回收
实验七 目的基因与载体的连接和重组质粒DNA转化大肠杆菌
实验八 总RNA提取
实验九 逆转录PCR(RT-PCR)
实验十 Southern印迹
实验十一 Northern印迹
实验十二 SDS-PAGE检测蛋白质的分子量
实验十三 碱性磷酸酶在大肠杆菌中的诱导表达
实验十四 Western印迹检测蛋白质的表达
附录 分子生物学实验室常规仪器设备