导语

  

内容提要

  

    由李玉花、徐启江主编的《现代分子生物学模块实验指南(第2版)》由10个模块组成，内容包括目的基因的克隆及分析，核酸分子杂交，大规模基因表达差异分析，单核苷酸多态性的检测，目的基因的遗传转化，蛋白质样品的制备、分离与鉴定，目的蛋白质表达、纯化与检测，蛋白质相互作用的研究，激光扫描共聚焦显微镜的应用，生物信息学软件与数据库应用，共52个实验。为了模块的完整性及对模块研究内容的全面理解，模块内除了编入适合本科教学的实验内容之外，还编入了扩展性的实验内容，可为本科生创新实验及本科生毕业论文提供参考。本书可作为综合性大学和师范、医学、药学、农林等院校生物类专业本科生和研究生的分子生物学实验教学用书，也可作为生物学相关领域研究人员的参考书。

模块一  目的基因的克隆及序列分析
  1-1  RNA的提取及检测
  1-2  RT-PCR方法扩增目的基因
  1-3  cDNA末端快速扩增法(RACE)合成目的基因
  1-4  目的基因的克隆
  1-5  目的基因的序列测定及初步分析
  1-6  cDNA文库的构建及目的基因的筛选
  l-7  mRNA差别显示克隆差异表达基因
  l-8  电子克隆法获得目的基因
  1-9  化学合成法获得目的基因
模块二  核酸分子杂交
  2-l  Southern杂交
  2-2  Northern杂交
  2-3  原位杂交
  2-4  原位RT-PCR．
模块三  大规模基因差异表达分析
  3-l  基因芯片分析
  3-2  基于第二代高通量测序技术的转录组测序分析
  3-3  差异表达基因功能富集分析
  3-4  实时荧光定量PCR检测基因表达
模块四  单核苷酸多态性的检测
  4-1  衍生酶切扩增多态性序列法
  4-2  Taqman荧光探针法
  4-3  高分辨率熔解曲线法
  4-4  定向诱导基因组局部突变技术
模块五  目的基因的遗传转化
  5-1  PCR法克隆目的基因全长
  5-2  Gateway技术构建表达栽体
  5-3  农杆菌真空渗入法遗传转化
  5-4  水稻愈伤组织的遗传转化
  5-5  RNAi发夹式载体构建及转化
  5-6  CRISPR／Cas9技术构建表达载体
  5-7  大规模突变体库的构建
模块六  蛋白质样品的制备、分离与鉴定
  6-1  蛋白质样品的制备
  6-2  蛋白质的定量
  6-3  SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
  6-4  双向电泳分离蛋白质
  6-5  荧光标记差异分析凝胶电泳法分析差异表达蛋白质
  6-6  蛋白质样品的质谱鉴定
模块七  目的蛋白质表达、纯化与检测
  7-1  目的基因原核表达质粒的构建
  7-2  谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白的表达与纯化
  7-3  组氨酸标签融合蛋白的表达与纯化
  7-4  麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的表达与纯化
  7-5  免疫印迹检测目的蛋白质的表达
模块八  蛋白质相互作用的研究
  8-1  经典酵母双杂交
  8-2  Pull-down分析蛋白质相互作用
  8-3  蛋白质亚细胞共定位
  8-4  免疫共沉淀
  *8-5  T7噬菌体展示筛选技术
  *8-6  细胞质酵母双杂交系统
模块九  激光扫描共聚焦显微镜的应用
  9-l  激光扫描共聚焦显微镜的基本使用
  9-2  花粉管內钙离子梯度分布的观察
  9-3  动物细胞微丝微管细胞核共定位观察
  9-4  激光扫描共聚焦显微镜检测荧光蛋白
模块十  生物信息学软件与数据库应用
  1O-1  常用分子生物学数据库检索
  10-2  常用分子生物学软件使用
  10-3  蛋白质结构及其相互作用预测
附录